Spectrophotométrie
Un article de Les colorants alimentaires.
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Tout d'abord, on réalise l'étalonnage du spectrophotomètre : | Tout d'abord, on réalise l'étalonnage du spectrophotomètre : | ||
A partir du logiciel Spectro, on choisit les longueurs d'onde sur lesquelles on veut travailler, entre 400 et 800 nm, longueurs d'onde du visible. Ensuite, on place une cuve remplie du solvant des différentes solutions : l'eau. On en fait ainsi la référence. On place un filtre vert, puis on déplace sa courbe d'absorbance afin de faire correspondre son maximum (T<sub>max</sub>)avec la longueur d'onde 525nm. | A partir du logiciel Spectro, on choisit les longueurs d'onde sur lesquelles on veut travailler, entre 400 et 800 nm, longueurs d'onde du visible. Ensuite, on place une cuve remplie du solvant des différentes solutions : l'eau. On en fait ainsi la référence. On place un filtre vert, puis on déplace sa courbe d'absorbance afin de faire correspondre son maximum (T<sub>max</sub>)avec la longueur d'onde 525nm. | ||
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Ensuite, pour l'acquisition, on place le filtre opaque (noir) pour faire le zéro d'absorbance. On replace la cuve remplie d'eau afin d'"effacer" son spectre d'absorbance avant la mesure sur les différentes solutions. On peut ainsi placer chaque solution pour obtenir les spectres d'absorption. | Ensuite, pour l'acquisition, on place le filtre opaque (noir) pour faire le zéro d'absorbance. On replace la cuve remplie d'eau afin d'"effacer" son spectre d'absorbance avant la mesure sur les différentes solutions. On peut ainsi placer chaque solution pour obtenir les spectres d'absorption. | ||
Pour le traitement des courbes dans regressi, on enregistre tous les fichiers avec l'extension .rrr. | Pour le traitement des courbes dans regressi, on enregistre tous les fichiers avec l'extension .rrr. | ||
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Version du 15 fév 2006 à 13:51
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Objectif
Nous cherchons à montrer que le sirop de menthe, produit de grande consommation, contient un ou des colorants alimentaires. La chromatographie ayant échoué, nous allons réaliser une spectrophotométrie.
Matériel
Pour réaliser cette spectrophotométrie nous avons utilisé:
- Un spectrophotomètre automatique
- Un filtre noir, de l'eau et un filtre vert permettant le calibrage du spectrophotomètre
- Un ordinateur disposant des logiciels Spectro et Regressi
- Une interface
- Une solution de Bleu de Pantenté à 20mg.L-1
- Une solution de Jaune Tartrazine à 40mg.L-1
- Une solution de sirop de menthe de la marque Tesseire dilué 25 fois
- Des cuves contenants les différentes solutions

Protocole expérimental
Tout d'abord, on réalise l'étalonnage du spectrophotomètre : A partir du logiciel Spectro, on choisit les longueurs d'onde sur lesquelles on veut travailler, entre 400 et 800 nm, longueurs d'onde du visible. Ensuite, on place une cuve remplie du solvant des différentes solutions : l'eau. On en fait ainsi la référence. On place un filtre vert, puis on déplace sa courbe d'absorbance afin de faire correspondre son maximum (Tmax)avec la longueur d'onde 525nm.
Ensuite, pour l'acquisition, on place le filtre opaque (noir) pour faire le zéro d'absorbance. On replace la cuve remplie d'eau afin d'"effacer" son spectre d'absorbance avant la mesure sur les différentes solutions. On peut ainsi placer chaque solution pour obtenir les spectres d'absorption. Pour le traitement des courbes dans regressi, on enregistre tous les fichiers avec l'extension .rrr.
On attribue le symbole λ
Résultat




